湖北省天门市2024年高三五月适应性考试试题(生物)

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表1引物15'GGAATTCCTCGAGGGCGAATGGGAAATTATCG3引物25'TTTGGATCCTTACGGCGGCGGAACCGGAC3*(1)若选用Xhol和Sau3AI对质粒A进行切割,为实现其与目的基因的连接,可在目的基因两端添加▲一。引物1的结合位点可能在(选填图1中的编号)。引物1的画线部分序列在A中(有/没有),引物2画线部分的序列在B中▲(有/没有)的可能性较高。(2)己知C中的培养基成分有水、酵母粉、蛋白胨和氯化钠,并按一定比例添加氨苄青霉素。将C中有生长优势的菌落经多次▲后作为菌种在发酵罐中培养,积累产物,发酵罐中培养基成分与C中培养基相较可不添加、,并采用▲的方法对装填在发酵罐中的培养基灭菌。(3)通过大肠杆菌生产的莫内林甜度较天然莫内林大为降低,天然莫内林也易因温度等因素导致甜度降低甚至甜味消失,科学家分析其中的原因并进行了后续的工程学改造,请结合所学知识,分析两种莫内林甜度降低的原因分别是▲(4)针对上述问题,从分子水对蛋白质进行改造是解决莫内林甜度降低的工程学思路。以甜味蛋白质的三维结构为基础,选择影响其与受体相互作用的关键氨基酸残基,进行定点突变,将获取的新基因与酵母质粒中构建▲,导入到真核细胞如甲醇营养型毕赤酵母中,并评价突变体的功能,筛选能产生等优良性能的甜味蛋白质的菌种。研究结果表明,相对于天然的野生型甜味蛋白质monellin,突变体E2N/E23A的甜味均提高了约3倍左右,而突变体E2N/E23A的热稳定性(Tm值)提高了约10C。(5)接上题,与大肠杆菌转化不同,毕赤酵母转化前一般先用低温山梨醇溶液处理,使其处于一种▲的生理状态;同时需将外源DNA处理成线性,分析原因可能是」。转化后的毕赤酵母进行发酵培养分为两个阶段:生长阶段,以甘油为碳源、获取大量的功能性细胞;诱导阶段,通过添加甲醇来诱导表达重组蛋白。培养基中除加入甘油、甲醇外,还需要提供的营养物质有第8页,共8页
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